ワクチンのタイプに触れてないのはずるいよね

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我々非接種者やこれから生まれてくる子供達へのメッセージてして…

宜しくお願いいたします。

連新社
@HimalayaJapan
コロナワクチンのゲノム解析は衝撃的な結果、プラスミドDNAの量が基準値の数百倍超え。
コロナワクチンには標準の数百倍のプラスミドDNAが含まれており、人体をスパイクタンパク質を長期間生産する「毒工場」に変えてしまう可能性がある。
(リンク先に動画あり)
https://twitter.com/himalayajapan/status/1641313951727210496

Deep sequencing of the Moderna and Pfizer bivalent vaccines identifies contamination of expression vectors designed for plasmid amplification in bacteria
https://anandamide.substack.com/p/curious-kittens?utm_campaign=post_embed

セネフさんのプレゼンはプリオンに関するものでした。これもスライドを使用して説明していて参考になりました。今回はこのRumble動画で聞いたことを中心に発信します。Kevinさんは誠実な研究者という印象でした。

KevinさんはmRNA型生物製剤へのDNAの大量残存をどのような経緯で見つけたかを説明していました。

mRNA型生物製剤に、転写が途中で完了した短いRNAが含まれているかもしれないと考えて、RNAを逆転写してDNAに変換して配列決定をしてみたら、予想していなかったベクター配列が見つかったというのが出発点。
その後、DNAの定量、塩基配列の決定などを行った結果、大量のDNAの夾雑を見つけたという流れです。

環状のプラスミドDNAも残存していて、大腸菌を形質転換できてコロニーができるくらいですから、スパイクタンパク質の全長とT7プロモーターが連結されたものが残存している可能性は否定できない。

Kevinさんは発現ベクターの配列を既に公開しており、さらにKevinさんが検証用に設計したPCRプライマーの配列も公開ずみ。
後に続く研究者は出てくるでしょう。今回、Kevinさんが調べたロットだけなのか、あるいは多くのロットに同様に発現ベクターが含まれているかはいずれ、明らかになるでしょう。

私が当初からmRNAワクチンのリスクを説明し、警告したにもかかわらず、残念ながら接種してしまった人間が、私の周辺にも少なからずいます。

そのため、今回のDNAの夾雑は特定のロットに限られていると言う結論を私は期待しています。どのような結論になるか他の研究者の追加の情報を待ちたいと思います。

T7プロモーターは哺乳類細胞では機能しないと思いがちですが、もう一つ論文を紹介しておきます。
ここで紹介する論文では、T7プロモーターがヒト細胞で機能することを示しています。T7プロモーターがHeLa細胞で機能するというもの。HeLa細胞はヒト子宮がん由来の有名な細胞。
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8406019/

スパイク遺伝子がT7プロモーターと連結された形態でヒトゲノムに組み込まれたときに、スパイク遺伝子が発現する可能性は考えておくべきでしょう。

スパイクのｍRNAは、環状プラスミドを制限酵素で一カ所切断して、それを使用してT7RNA合成酵素でｍRNAを大量に合成しています。

通常であれば、この方法では、1分子のDNAから10倍〜100倍のｍRNAを合成できるとされていますので、このように大量に夾雑していることは考えにくいのですが、ウリジンが修飾されたシュードウリジンであるためにRNA合成の効率がかなり低下している可能性も考えられますので、この点も検証が必要です。

ｔRNAにはシュードウリジンが含まれていますので、ｔRNAを合成するRNA合成酵素はシュードウリジンを効率よく利用できるはずですが、mRNAにはシュードウリジンは通常含まれません。
したがってｍRNAを合成するタイプのRNA合成酵素がシュードウリジンをウリジンと同様に利用できるかは不明です。

混じっている発現ベクターが、環状のものか、あるいは切断されたものかをKevinさんは解析していますが、環状のものも切断されたものも両方含まれている。

環状のものだけであれば、残存したとしても、ゲノムに組み込まれる際には、ランダムな場所で切断されてからゲノムに組み込まれることになります。
この場合にはゲノムに組み込まれても、スパイクタンパク質を発現する可能性は低いでしょう。

しかし、実際には、T7プロモーターの上流部で切断していますので、もしもゲノムに取り込まれるとすると、T7プロモーターとスパイク遺伝子が連続した形でゲノムに組み込まれる可能性は高いと思います。

発現ベクターの夾雑が招くリスクはもう一つあります。

SV40プロモーターがこの発現ベクターには組み込まれていますので、この配列を含むDNA断片が、発がん遺伝子の上流部に組み込まれると、発がん遺伝子の発現が亢進します。
このことは細胞のがん化のリスクを高めることは言うまでもありません。

DNA型腫瘍ウイルスであるSV40の強力なプロモーターのゲノムへの組み込みのリスクはKevinさんも言及。

このようにベクターDNAが混じっているようでは、エンドトキシンの混入も懸念されます。これも彼は動画でコメントしています。
エンドトキシンは細菌由来の毒素でアナフィラキシーなどの原因になります。

何度も書いているように、発現ベクターが、mRNA型生物製剤に大量に残存しているということを発表しているのは現時点ではKevinさん一人です。　
またKevinさんはロットを多数調べたわけでもありません。

しかしながら、ファイザーとモデルナ両方で同様に観察されたということを私は大変重く見ています。

Kevinさんは発現ベクターの配列データを既に公表済みであり、PCRのプライマーも発表していますので、他の研究者にも追試は可能になりました。KevinさんはLNPを除去しないといろいろな反応が動かない可能性についてもコメントしていましたので、実験する人は注意が必要です。
DNAを精製後解析すべきです。

この図は発現ベクターの遺伝子マップ。
赤い部分がスパイク遺伝子、oriと書かれた黄色い部分は大腸菌でDNAを複製させて増やすための複製開始点。赤で示されたのがスパイク遺伝子ですが、その上流部、矢印の起点付近にT7 promoter配列があります。
この配列がｍRNA合成では重要なはたらきをします。
https://twitter.com/molbio08/status/1635040766207864832/photo/1

T7 promoter配列ですが、T7というのは大腸菌に感染するウイルスの1種のこと。
この配列があると、そこにT7由来のRNA合成酵素が結合して大量にｍRNAを合成することができます。
さらに、このDNAには、SV40プロモーター配列も存在していますので、その下流の遺伝子はヒト細胞でも発現。薬剤耐性遺伝子も存在します。

NeoR遺伝子（オマイシンという抗生物質に耐性にするための遺伝子）が加えられています。
この選択マーカーは、大腸菌でも哺乳類細胞でも使用できますので、ファイザーの研究者たちは、この発現ベクターをヒト細胞に導入して実験することも考えていたのかもしれません。

MluIとかStuIとかは制限酵素部位。
MluIとかStuIとかいうのが円からはみ出して書かれていますが、これらは制限酵素のことで、細い線で示された部分が、これらの制限酵素（ある特異的な演繹配列を認識してそこで切断する酵素のこと）で、切断される部位です。制限酵素切断部位と呼びます。
このプラスミドの全長は、約7500塩基でかなり長い部類。

mRNA型生物製剤に混入しているとされていた量は、最初は3000分の1とか350分の1とかだったのですが、MITでヒトゲノムの解析プロジェクトに参加し、次世代型DNAシークエンサーのSOLidの開発にも参加した研究者のKevin McKernanさんが自分のブログで発信しました。
それがきっかけで問題になりました。

さあ大変だということで、こんなイラストが貼り付けられた発信もあります。　
https://twitter.com/molbio08/status/1635045195342577665/photo/1

アメリカでは追加接種を行う人はほとんどいませんし、追加接種者の割合も日本より遙かに少ないので、今更、なんだという雰囲気です。
一方、日本ではDNA混じりのｍRNA型生物製剤をなんと、これからも接種しようとしています。

政府は、ｍRNAの合成に使用した発現ベクターが、ｍRNAの20％から35％含まれたものを今から接種するのでしょうか。
スパイク遺伝子をヒトゲノムに導入したらどうなるかという大規模な人体実験を行うようなものです。
この図に書かれたような実験をヒトで行うことになります。
これは正気の沙汰ではない。
https://twitter.com/molbio08/status/1635046073675960321/photo/1

脂質ナノ粒子（LNP）にプラスミドDNA、それも直鎖状にされたものを内包させると、高い効率で細胞にDNAが導入されます。

この際の導入される細胞は、非特異的で、LNPが遭遇した細胞に片端から遺伝子が入ります。
細胞内に導入された遺伝子は一部は細胞内で分解されますが、多くの分子は核に移行します。

DNAを細胞に導入した場合、この確率は1％から1万分の1程度と言われています。
この遺伝子の導入反応には逆転写酵素は不要です。そのため、ｍRNAだけのものと比べると格段に高い確率でゲノムに組み込まれます。
ここで明記しておきますが、この発見はまだ研究者一人のものでブログ記事です。
さらに続けます。

プラスミドというのは、細菌の染色体外DNAです。
遺伝子工学で使用される、遺伝子を細胞に導入するときに使用するベクターの1種です。
これには遺伝子の改変に主として使用するクローニングベクターと遺伝子発現を目的とした発現ベクターとがあります。今回のものは発現ベクターです。

今回、問題になっているのは発現ベクターです。

発現ベクターというのは発現したい、つまり、mRNAを合成したい遺伝子の上流部にプロモーター配列を持っていて、細胞に導入するとｍRNAが大量に生産されます。あるいは試験管内でRNA合成酵素と基質を加えるとmRNAを合成することが可能です。

ここで、mRNA型生物製剤に使用されているｍRNAがどのように製造されているかを説明。

スパイク遺伝子はかなり長いため、有機合成的な方法でのいわゆる化学合成は不可能。
そのため、DNAからｍRNAを試験管内で酵素を使用して合成する方法を採用。RNA合成酵素を使用してDNAから合成するというものです。

RNAを構成する基質、
つまり、構成ブロックですが、ヌクレオチド三リン酸を4種類、A,C,U,Gを加えます。
この中のU,ウリジンが、本来のウリジンではなく1メチルシュードウリジンを使用。T7RNA合成酵素は強力なRNA合成能力を持っており、この方法でシュードウリジン化されたmRNAの大量生産が可能です。

反応が終了した時点では、
RNAにDNAが混じっている状態ですので、この反応が完了した段階でDNAを除く必要があります。

DNAを除く方法ですが、
RNAには反応せずにDNAだけを分解する酵素を使用すればDNAを断片化して取り除くことは可能。
今回はこの酵素処理が不十分だったと考えられています。

既にmRNA型生物製剤にDNAが混じっているという報告があったことを契機にKevinさんが混じっている量を調べたのが今回紹介している記事です。

どのような方法でDNAの量を策定したかを細かく説明されており、その方法は妥当なものだと思いました。
結果の一例として定量的PCR法の結果をあげておきます。
定量的PCR法、アガロースゲル電気泳動法などで解析し、さらには次世代型DNAシークエンサーで塩基配列解析のも行っています。

プラスミドは直鎖状にされていますが、環状のものも残存していたということ。
解析の結果、最終的に含まれるDNAの量はｍRNAの20％から35％というのが彼の結論です。

ここで彼の元ツイッターを貼り付けておきます。
https://twitter.com/Kevin_McKernan/status/1634388345496170496

Kevinさんですが、現在は受託分析のバイオテックのCSOで創業者。
彼は関連する論文をたくさん発表しています。ここからブログ記事に行くことも可能です。

途中でも書いておきましたが、これは査読済みの論文の紹介ではありませんが、これが事実だった場合のインパクトはかなり大きいので紹介することにしました。
彼は論文として発表することを考えていますが、問題は採択してくれるジャーナルがあるかどうかでしょう。

この定量結果が正しいのか、ロットごとのばらつきはあるのか、など残された課題は多々ありますが、品質に問題のあることは否定できないでしょう。

発現ベクターDNAがこれだけまじったものをヒトに接種すると、かなりの確率でスパイク遺伝子がゲノムに取り込まれます。
その影響は計り知れません。

Kevinさんが行った実験はそれほど困難ではありません。分子生物学の研究室であれば容易に実験可能。

残念ながら、mRNAワクチンは研究者に供給されておらず実験不可能。
厚労省の関係研究機関はこのことが事実かどうか実験して国民に示す責任があると思います。

否定されるまでは接種を中止すべきです。
このようなゲノムの改変につながる懸念が出てきた以上、接種を即座に中止すべきです。

DNAが混じっている量にばらつきがあるとしても、接種を繰り返すほどリスクは高まります。
非接種者はもう接種しないでしょう、接種された方も追加接種は絶対にやめましょう。
ここで立ち止まることが重要です。

『最初の武漢型にも入っていました』

ファイザーコロナワクチンへのDNA混入が半端ない

多くの方から一価ワクチンについてご質問をいただきました。
ある方々は、ファイザーの一価ワクチンを1ケース送ってくださいました。
qPCRとRT-qPCRは、当社の煮沸消毒法とqPCR法を用いて実行されました。
その結果、EMAの制限値を18-70倍も超えていました。
誰もこれを確認することなく、数十億個が投与された。

https://ameblo.jp/don1110/entry-12796032233.html

遺伝子組み換えが起きている証拠にはならないがゲノムに組み込まれる可能性が
あるということなのだろう。

連新社@HimalayaJapan

コロナワクチンのゲノム解析は衝撃的な結果、プラスミドDNAの量が基準値の数百倍超え
コロナワクチンには標準の数百倍のプラスミドDNAが含まれており、人体をスパイクタンパク質を長期間生産する「毒工場」に変えてしまう可能性がある

接種者が幼い子供たちの健康と命を脅かしている事を自覚してくださいよ。
ペットにも異常事態が起きている。
未接種者にとっては大変、迷惑（こりゃ、マスクはそうそう外せないわね。屋内では）

世界では　ワクチン接種　なんて　誰もやっていない

ゴミテレビは　とことん　腐っている

表題他･･
･･･WHO　新型コロナワクチンの接種指針改定　
健康な成人「追加接種を推奨しない」･･･

だからと言って、
ＷＨＯの無差別大量殺人傷害テロの主犯！
･･･テド●ロスや配下の従業員、全員の、

無差別大量殺人傷害犯罪が、
免責されるわけありません！

まずは、
全員、死●刑処理してから、次のこと考えましょう〜ね！

そう、そいつらと、そいつらの親族様にも、

しっかり、確実に、何度でも、強気で行けと････
お伝えしてください！

そして、そのあとは･･･ディナーの後で･･･
と、待っとれませんので、速攻で、
●してあげてくださいね！

全世界の、体内に時限爆弾を接種された皆様や、
辛うじて打たなかった皆様全員で･･･そいつらを、
身ぐるみはいで●処理ください！
そうしないと、何度も同じことを繰り返します！
そして、つけ上り、ますます狂暴化します！！
そして、･･･
数に限りがあります･･･お急ぎください！

よろ●くお願いします。