本橋 秀之 Hideyuki Motohashi, Ph.D. @Motohashi_Hide 😱...これは驚きとしか言いようがない...mRNAコロナワクチンにプラスミドDNA(発現ベクター)が混入!これの意味する所は、導入された細胞でスパイクタンパク配列を含む発現ベクターが安定的に存在し、ネオマイシン(抗生物質)耐性遺伝子の発現のオマケ付き、仕舞いにはゲノムに組み込まれる危険率上昇!もしこれが真実なら、本来はハイクオリティーが要求される核酸医薬を、ワクチンとするために、やっつけ仕事で慌てて大量生産したのがやっぱり問題だったとおもう... 一番最初にツイートした時に、「強力プロモーターでスパイクタンパクが高発現!」というような煽り書きをしてしまって、 投稿直後に、スパイクタンパク配列の上流にあるT7プロモーターは大腸菌などの原核生物で機能するものだからヒト細胞では作用しないんじゃ(?)と気づいてすぐ消して、 「スパイクタンパク配列を含む発現ベクターが安定的に存在し」と投稿し直した(そのため分かりにくくなったかも)のですが、molbio08先生のその後のツイートによれば、T7プロモーターは哺乳類細胞でも機能する可能性ありで、これはさらに悪い知らせになると思います。。。 https://mobile.twitter.com/Motohashi_Hide/status/1635250401674149888 伽羅wayA@Yesturdayaha すみません〜、スパイクたんぱく発現細胞というのは、具体的にいうと、どういうことになると予想されるのですか?皮膚疾患とか?卵巣機能不全?とかの内臓疾患? の畏れですか?
本橋 秀之 Hideyuki Motohashi, Ph.D. @Motohashi_Hide 病態は発現し続けている場所(臓器・組織)によって変わってくると思いますね。 ワクチン後遺症の症状や経過が多種多様なのも、人それぞれどこに入り込んでいるか様々だからだと思います。 入り込んだ場所(細胞)で、本来のシュードウリジン修飾mRNAからのスパイクタンパク合成だけでなく、ワクチンに混入した発現ベクターからの安定的なmRNA発現→スパイクタンパクもあるとなとなれば、様相は変わってきますよね。 しかも、自分の細胞のゲノムDNA組み込まれてしまえば、もっと長期の安定的な発現が実現してしまう可能性もあり、スパイクタンパクの害が強化される、その結果として長期の障害が出るという可能性に繋がりうると思います。
ただそれは理屈の上でそういう可能性もありうるという事なので、現実問題として大した影響はないかもしれません。一番の問題は、医薬品なのに、しかもほとんどの人が接種する(した)のものなのに、こういう雑な製造というかクオリティーの低いものを本当に作った事が激おこ😡🖕に値する案件ですね https://mobile.twitter.com/Motohashi_Hide/status/1635598890669084672 ======= 御茶ノ水博打🚲@koronanoukyuus1 それでは、私なりの解釈を書いてみます。 1つめの可能性は、元記事のプラスミド混入量の見積もりが誤りだった可能性。私が理解してない手法もあり、断言はできないけど、プラスミド量はmRNA量との比率で求めているが、絶対量を調べてないのが気になります。 やろうと思えばpPCRで既知濃度のプラスミドをコントロールとしてプラスミドの絶対量が測定できるはずです。 次に、元記事が正しかったとして、プラスミドの混入だとすると、量が完全におかしい。精製しなくてもプラスミドの100倍以上のmRNAが合成されるので、3割も含まれるわけがないのです。では、意図的に混入させたかというと、悪意を持って有害事象を起こすのであれば、mRNAの上流にプロモーターを配置するはずだろうし、それこそゲノム組み込みに必要な酵素や配列を付加してるはず。 基本設計に発現プラスミドを使った理由については、どうせ使うのは合成させたmRNAなので、どんなベクターでも構わなかったという単純な理由が考えられる。 あるいは、培養細胞にスパイクを発現させて他の実験に使えるように作った物からプロモーターを除去すれば手間も省けて、実績のある物を鋳型として使える。 SV40プロモーターについては、汎用の発現ベクターとして極ありふれたものです。培養細胞のゲノムに同プラスミド上の遺伝子を組み込まれたものを選択するためにNeoR/KanRを発現させるプロモーターとしてSV40プロモーターが付いている便利なものです。 合成されたmRNAを精製してきて使うぶんには、普通に考えればプラスミド上にSV40プロモーターがあっても問題はないと考えたのだろうと思います。 もちろん、可能性として、これがゲノムに挿入された時にがん化を誘導する可能性はゼロではないです。ただ、何にも考えてなかっただけなんじゃないかなぁと思っています。 https://mobile.twitter.com/koronanoukyuus1/status/1635957413907169280 御茶ノ水博打🚲 @koronanoukyuus1 plasmidのSV40 promotorがhuman genomeにintegrateされることを危惧するなら、感染したvirusのpromotorがintegrateされる可能性も危険が危なくなっておちおち風邪も引けない。 なんたって、プラスミドよりウイルスの方がよっぽど細胞に入りやすいですから。しかもプラスミドと違って、ウイルスゲノムは細胞内でワラワラ増殖するしw プラスミドなんか可愛いものだよ。 https://mobile.twitter.com/koronanoukyuus1/status/1635449497882066945
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